一、浅析猪的稀释精液配制技术（论文文献综述）
陈世伟,张兆旺,孟锦涛[1]（2021）在《抗冻剂组合和平衡时间与鸡精液冻后活力关系的研究》文中指出为了研究抗冻剂组合和平衡时间与鸡精液冻后活力的关系,试验选用8%甘油、8%甘油+6%二甲基亚砜（DMSO）、8%甘油+6%DMSO+4%乙二醇（EG） 3个抗冻剂组合与基础液Ⅰ液（渗透压约为330 mOsm, pH值为7.0）组成冷冻稀释液（Ⅱ液）,加鸡精液平衡0,30,60,90,120,150,180,210 min,测定不同平衡时间下鸡精液冻后活力和精子复苏率。结果表明:抗冻剂8%甘油和8%甘油+6%DMSO均能提高鸡精液冻后活力,且解冻后精子活力随着平衡时间的延长呈现先升高后降低的趋势,而抗冻剂组合8%甘油+6%DMSO+4%EG使鸡精液冻后活率呈现下降趋势;用8%甘油、8%甘油+6%DMSO、8%甘油+6%DMSO+4%EG分别作为抗冻剂稀释精液,在精液稀释后平衡时间分别为60,30,0 min时,其解冻后精子活力依次为0.416 7,0.433 3,0.416 7,均明显高于其他平衡时间;精子复苏率分别为52.09%、54.16%和52.09%;存活时间分别为169,145,89 min。说明添加抗冻剂组合8%甘油+6%DMSO的稀释精液在平衡30 min时,精液解冻后精子活力最高,复苏率最高,存活时间较长。
施文[2]（2020）在《在稀释液中添加虾青素对鸡精液保存效果影响的研究》文中认为现代化种鸡养殖场为了减少公鸡的饲养数量、提高配种受精率和生产效率,普遍采用人工授精技术辅助鸡场繁殖。然而,人工采集出来的精液随着保存时间的延长,精液活性氧（ROS）水平升高,精子发生氧化应激,最终导致其活力下降甚至凋亡,直接影响受精率。许多研究表明,具备较好抗氧化损伤能力的稀释液可以有效降低精子的氧化损伤水平,有助于保持精子活力。因此,本研究在鸡的精液稀释液中添加不同浓度的虾青素——一种较强的天然抗氧化剂,对低温或常温保存后的精子进行了一系列的检测,包括精子活力、畸形率、顶体和头尾部质膜完整率、ATP含量、乳酸脱氢酶（LDH）活性、总抗氧化能力（T-AOC）、ROS,丙二醛（MDA）水平、超氧化物歧化酶（SOD）、谷胱甘肽过氧化物酶（GSH-PX）、过氧化氢酶（CAT）和受精率等;并将得到最佳浓度虾青素稀释液后与添加番茄红素（0.2mg/m L）稀释液进行比较,为改进鸡精液稀释液、提高种鸡人工授精效率奠定基础。本研究主要结果如下:首先,在低温保存（4℃）条件下,精液稀释液中添加虾青素可提高贮藏精液质量,虾青素组精子活力（0.20μg/m L,20.73±0.95%）、顶体完整率、头尾质膜完整率、LDH活性和ATP含量均高于对照组（P<0.05）;0.35μg/m L虾青素添加组中精液的精子畸形率在第5d时高于对照组（P<0.05）,T-AOC、ROS、SOD、CAT、GSH-PX和MDA指标均优于对照组。0.20μg/m L虾青素添加组的受精率最高（63.25±4.42%）。其次,在常温（25～30℃）条件下,虾青素组的精子活力（0.20μg/m L,19.13±2.26%）、顶体完整率、头尾部质膜完整率、LDH活性和ATP含量均高于对照组（P<0.05）;虾青素添加组中的精液T-AOC、ROS和MDA指标较优（P<0.05）;在0.20μg/m L虾青素添加组中的精液SOD、GSH-PX和CAT指标最优（P<0.05）。使用采出后稀释的精液进行人工授精,0.20μg/m L虾青素添加组的受精率最高（93.23±4.80%）。最后,本研究使用0.20μg/m L虾青素稀释液与0.2mg/m L番茄红素稀释液进行比较,结果显示在低温条件下保存5d的虾青素添加组中精液的精子质膜完整率高于番茄红素组（P<0.05）,但CAT活性低于番茄红素组。两组精子活力、顶体完整率,T-AOC、ROS指标均无显着差异。在常温条件下保存2d的虾青素添加组中精液的精子活力（21.43±4.83%）、顶体、质膜完整率,T-AOC均高于番茄红素组（P<0.05）,CAT活性低于番茄红素组。两组精子ROS水平均无显着差异。综上所述,公鸡精液稀释液中添加的虾青素可以增强精液的抗氧化性,进而提升精液质量,本研究结果表明当虾青素的最佳添加浓度为0.20μg/m L,精子质量和受精率均有提高。与添加0.2 mg/m L番茄红素稀释液相比,添加0.20μg/m L虾青素稀释液在精子质膜完整性和T-AOC等参数优于前者,对精液保存效果更好。本研究结果将为虾青素作为强抗氧化剂在鸡精液保存稀释液中的应用提供理论依据。
阿娜尔[3]（2020）在《蒙古马精液冷冻保存的研究》文中进行了进一步梳理蒙古马是世界上古老的品种,也是优秀的地方品种。通过冷冻精液人工授精技术可以加快蒙古马提纯复壮及提高本品种选育进程。由于农业机械化的推进及国内对马繁殖技术关注度的下降,目前还没有人对蒙古马精子的冷冻保存方法进行过系统的研究,仍未探索到一种成熟有效并可推广到生产实践中的冷冻保存技术程序。为了研究出在实际生产中能够推广应用的蒙古马精液冷冻保存方法,进一步完善蒙古马冷冻精液品质,本研究对蒙古马精液冷冻程序及冷冻保护液配方的进行了优化,同时,使用最优冷冻保护液配方和冷冻保护程序对蒙古马精液进行了冷冻,并开展了人工授精受胎率验证试验,其结果如下:（1）将蒙古马精子置于不同渗透压（30、50、100、200、240、300、360、420、480、550、600mOsm/kg）的盐水溶液中孵育后,测定其前进运动精子百分比（PM）和精子质膜完整率（MI）。结果显示,蒙古马精子渗透压耐受范围为200～400mOsm/kg,从此渗透压再回到等渗状态时,其活力是可以恢复的,而渗透压超出这一范围其活力恢复能力降低。2)比较了沉降离心法之不同离心力和离心时间（400 g,15 min;600 g,10 min;1000 g,7 min）和缓冲离心法（使用商品化离心垫）对蒙古马精液冻前冻后精液质量和精子损失率的影响,结果显示,600 g,10 min组离心方法获得的精液冷冻前后TM、PM、VAP、VSL、MI和精子损率均与使用离心垫进行离心的对照组无显着差异（P<0.05）,该方法可代替商品化离心垫使用。（3）比较了不同平衡时间（0 min、100 min和120 min）、不同冷冻降温速率（液氮熏蒸高度2 cm、3 cm和4 cm）对蒙古马精液冷冻效果的影响,结果显示,蒙古马精液冷冻之前需进行一段时间的冷却平衡。获得可接受的解冻后质量最佳平衡时间是应将蒙古马精子冷却至4℃并平衡100 min。距离液氮面高度3 cm的熏蒸高度获得的冷冻效果与程序化冷冻仪相当。（4）以INRA82+2%卵黄基础液,添加4种不同浓度甘油（2%、3%、4%和5%）和二甲基甲酰胺（4%、5%、6%和7%）作为冷冻保护剂对蒙古马精液进行冷冻,分别测定了在4℃平衡100 min后的质量指标和冷冻-解冻后的质量指标。结果显示,冷冻-解冻后,3%gly、4%gly、5%gly和7%DMF组TM和PM均显着高于其他组（P<0.05）;添加2%gly组、3%gly组和7%DMF组MI显着高于其他组（P<0.05）。综合考虑TM和MI,蒙古马精液冷冻保护液中适宜甘油比例为3.0%。（5）比较了 8种不同冷冻保护液:INRA82基础液+5种不同浓度低密度脂蛋白（LDL,0.5%、1%、2%、3%和 5%）,INRA82 基础液+2%卵黄,INRA82 基础液+2%离心卵黄和INRAFreeze商品稀释液对蒙古马精液冷冻效果的影响。以上冷冻保护液均添加了 3%甘油。结果显示,在冷冻-解冻后,2%LDL、2%卵黄和INRAFreeze组TM、PM、VAP、VSL、VCL、MI和AI均显着高于其他组（P<0.05）。表明,2%的LDL和2%的卵黄对蒙古马精子可能具有低温保护作用,2%的卵黄提取步骤简单,更容易获得。（6）在脱脂奶基础液上,选择4种不同浓度的葡萄糖（0、67、125和147 mM）与270mM乳糖、50mM棉子糖组合,制备成精子低温保存稀释液,比较了其对蒙古马精液冷藏保存的效果。结果显示,125 mM葡萄糖+270 mM乳糖对蒙古马精液低温保存质量有显着提高作用。（7）以INRA82作为基础稀释液,分别添加谷胱甘肽（0、5、7、10和20mg/mL）、海藻糖（0、25、35和50 mg/mL）和联合添加谷胱甘肽+海藻糖（0+0、5+35、5+50、7+35和7+50mg/mL）制备成含有不同氧化剂的冷冻保护液,将浓缩处理后的马精子分别置于上述稀释液中稀释、冷冻和解冻,利用精子常规品质检测方法和酶联免疫分析法,检测精子常规品质和抗氧化相关指标。结果显示:1)5 mg/mL谷胱甘肽对精子TM、PM和MI均有提高,可降低精液中MDA含量,添加谷胱甘肽可显着提高CAT和GSH-PX活性（P<0.05）;35和50mg/mL海藻糖可提高TM、PM、AI和MI,且35 mg/mL海藻糖可显着降低MDA含量（P<0.05）;2)联合添加5mg/mL谷胱甘肽+35 mg/mL海藻糖可显着提升马精液的TM、PM、AI和MI（P<0.05）,还可显着降低MDA含量（P<0.05）,提高SOD活性和GSH-PX活性。综上,联合添加5 mg/mL谷胱甘肽+35 mg/mL海藻糖一定程度上可通过改变酶活性,对精子氧化应激产生保护作用,提高了马冷冻-解冻后精液质量。（8）在以上研究基础上,筛选出一套自配冷冻保护液配方和简便冷冻程序,将自配冷冻保护液组、INRAFrezee组、鲜精INRA96稀释组处理的精液用于30匹母马共60个排卵周期进行人工授精,通过妊娠检查,进行受胎率统计。结果表明,鲜精人工授精受胎率为70%,INRAFreeze冻精人工授精受胎率为50%;自配冷冻保护液冻精人工授精受胎率为50%。综上所述,经过筛选的自配蒙古马精液冷冻保护液成本低廉、制备步骤少、简单易操作,制备条件温和易控制,冻后活力在35%以上,情期受胎率达到了 50%,能够满足生产需要。
朱振东[4]（2020）在《猪精子能量代谢的调控机理研究》文中认为随着养猪业的规模化、专业化、集约化管理程度增加,人工授精技术的推广应用越来越广泛。猪人工授精技术对于提高生猪生产、促进优良种公猪利用率及加快遗传育种改良进程具有重要意义。猪人工授精技术使用的精液为15～17oC条件下保存的液态稀释精液。液态稀释精液的保存效果是制约猪人工授精技术发展的重要因素之一。精子运动的维持依赖于自身的能量供应。糖酵解和氧化磷酸化途径是体细胞广泛存在的重要能量代谢途径。细胞对能量代谢途径的选择取决于其微环境的能量代谢底物类型。精子在精浆和子宫液中做直线运动及在输卵管液中做超活化运动,即精子的代谢参与精子运动的调控。但是精子代谢对精子运动的调节作用及机制尚不清楚。通过探究精子代谢而改良稀释液成份对建立高效的猪精液保存稀释液配方具有重要意义。因此,本研究从精子代谢入手,探究精子氧化磷酸化途径及其相关作用因子在维持精子直线运动中的调控机制。本研究首先利用低糖模型探究糖酵解和氧化磷酸化供能方式对精子运动的影响,并检测精子运动轨迹变化及线粒体的转录翻译。其次,通过低糖稀释液模型及精子线粒体功能分析探究氧化磷酸化副产物活性氧（reactive oxygen species,ROS）对精子运动的损伤机制。此外,通过检测精子的谷胱甘肽合成及磷酸戊糖途径探究精子自身如何维持精子线粒体氧化磷酸化的运转。本研究主要取得如下结果:（1）精子在高糖液稀释液中做圆圈运动或类圆圈运动;降低稀释液中的葡萄糖含量促进猪精子直线运动。低糖稀释液通过激活精子线粒体活性、进而促进线粒体合成ATP（adenosine triphosphate）。精子直线运动的能量来源主要依靠线粒体合成的ATP。（2）猪精子在低糖稀释液的体外孵育过程中,精子存在线粒体基因的转录与翻译。线粒体翻译抑制剂处理结果揭示精子线粒体的转录与翻译参与了精子运动的调控。精子线粒体转录翻译主要通过影响线粒体功能,进而影响线粒体ATP的合成而调控精子的运动。（3）低糖稀释液在促进精子线粒体氧化磷酸化供能的同时也产生大量的副产物ROS,过量的ROS会氧化损伤精子的功能、降低精子的直线运动能力。（4）ROS主要氧化损伤精子线粒体蛋白转录系统及线粒体ATP合成系统。研究发现,随着胞内ROS含量的增加,精子线粒体呼吸链蛋白MT-ND1（NADPH dehydrogenase subunits 1）、MT-ND6（NADPH dehydrogenase subunits 6）和线粒体转录因子POLRMT（mitochondrial RNA polymerase）、TFAM（mitochondrial transcription factor-A）的4-HNE（4-hydroxynonenal）修饰增加,即MT-ND1、MT-ND6、POLRMT和TFAM的氧化损伤增加。并且,精子线粒体DNA也受到ROS的攻击而被氧化损伤。（5）在低糖稀释液中外源添加线粒体靶向抗氧化剂PQQ（pyrroloquinoline quinone）和Co Q10（coenzyme Q10）可以维持精子的直线运动,但是当线粒体翻译被抑制的情况下,添加这两种抗氧化剂均不能挽救精子的运动,说明PQQ和Co Q10不能有效减缓ROS对呼吸链上的蛋白MT-ND1和MT-ND6的氧化损伤。这主要是由于呼吸链上的蛋白更近于ROS产生的位点。PQQ和Co Q10主要通过保护线粒体的转录系统（POLRMT和TFAM）而维持线粒体的转录与翻译,进而为呼吸链上的来源于线粒体转录翻译蛋白（如MT-ND1和MT-ND6等）的周转提供新蛋白,维持线粒体ATP的合成,提高精子的直线运动。（6）猪精浆中存在合成谷胱甘肽（glutathione,GSH）的氨基酸底物,其中蛋氨酸、甘氨酸、谷氨酸、丝氨酸含量较高,半胱氨酸含量较低。在低糖稀释液中添加蛋氨酸、甘氨酸、谷氨酸及丝氨酸可以促进精子合成GSH,并缓解精子的氧化损伤而维持精子的直线运动。猪精子存在利用蛋氨酸合成GSH的途径,精子存在由蛋氨酸合成GSH途径所涉及的蛋白酶CBS（cystathionine beta synthase）、CTH（cystathionase）、GCLC（glutamate-cysteine ligase）和GSS（glutathione synthetase）;并且蛋白酶CBS和CTH含量随着精子氧化应激程度的增加而增加,GCLC和GSS蛋白酶含量则未发生显着变化。说明氧化应激可以诱导精子合成CBS和CTH蛋白酶,进而利用蛋氨酸合成GSH而减缓ROS诱导的氧化损伤。（7）氧化应激激活精子的ERK1/2-e IF4E-RSK信号通路。随着精子胞内ROS含量的增加,精子内的p-ERK1/2、p-RSK、p-e IF4E水平增加,这也揭示了精子可以通过自身氧化还原平衡系统减少ROS的氧化损伤。（8）精子的磷酸戊糖途径（pentose phosphate pathway,PPP）参与精子的直线运动调控。无糖稀释液不能持久维持精子的直线运动,而20%葡萄糖稀释液中则可以持久维持精子直线运动。低糖稀释液中的葡萄糖进入合成NADPH的PPP途径,未进入糖酵解供能途径。精子衣康酸修饰是调节其葡萄糖代谢重编程的关键因子。低糖稀释液可以促进三羧酸循环产生中间代谢产物衣康酸,衣康酸对精子糖酵解途径的ALDOA（aldolase A）酶进行修饰,使其失活,进而降低精子的糖酵解途径,使葡萄糖进入PPP途径,参与NADPH的合成,进而参与自身氧化还原稳态的调控。综上所述,本研究探究了精子代谢对直线运动的调控作用。发现精子直线运动主要受线粒体氧化磷酸化供能调控;氧化磷酸化副产物ROS主要氧化损伤精子线粒体转录翻译系统和能量合成系统;精子自身通过调节谷胱甘肽合成和磷酸戊糖途径而调节其胞内氧化还原平衡稳态,进而维持精子的高速直线运动。本研究发现为高效猪精液保存稀释液的研发提供理论依据,并为高效猪人工授精技术体系的建立奠定基础。
何晓燕[5]（2019）在《海扬黄鸡配套亲本精液品质比较及特定稀释液稀释效果的分析》文中提出试验以中速型海扬黄鸡三系配套系亲本公鸡为素材,采用单因子完全随机试验设计方法,研究比较三个亲本群体公鸡各30个个体精液品质间的差异,揭示三个亲本群体的精液品质的特性,为后续公鸡繁殖性能的提高提供基础数据;同时以FF群体公鸡的精液为试验材料,利用京海集团研制的精液稀释液研究不同稀释倍数和稀释后不同放置时间对精液品质的影响,寻找最佳稀释比例,提出不同稀释比例条件下保存时间,为鸡的人工授精提供参考;最后研究了稀释液高温灭菌和加双抗后,不同存放时间对精液品质的影响,以期解决精液稀释液保质期的问题。论文研究围绕提高种公鸡精液品质,提高公鸡的种用价值,保证受精率,从而降低种公鸡的饲养量,节省种公鸡养殖成本。主要研究结果如下:1、海扬黄鸡亲本配套系三个品系之间的精液品质存在一定差异,FF系公鸡精液的精液量、精子密度、活率、质膜完整性和有效精子数均极显着高于JJ和BB系公鸡（P<0.01）;FF系公鸡精液畸形率极显着低于BB系公鸡（P<0.01）,但和JJ系公鸡没有显着差异（P>0.05）。2、特定稀释液不同稀释倍数对精液品质的影响以1:2倍数稀释的精液活率在体外存放2小时之后极显着高于原精液和1:1倍数稀释的精液（P<0.01）,1:2倍数稀释的精液死精率极显着低于1:1倍数稀释和原精液（P<0.01）,不同稀释倍数对精液的畸形率无显着影响（P>0.05）;在体外存放2小时后,1:2倍数稀释的精液活率高于1:1稀释和原精液,死精率和畸形率明显低于1:1稀释和原精液,1:1倍数稀释的精液效果最不好,1:2倍数稀释效果最好。3、不同稀释液在存放不同时间下对精液品质的影响自配稀释液在0.5和1.5小时的精液活率均显着高于基础稀释液和BPSE稀释液（P<0.05）,BPSE稀释液的精液畸形率在0.5小时和1.5小时均显着大于基础稀释液和自配稀释液（P<0.05）;但三种稀释液对精子死精率的影响没有明显差异（P>0.05）。4、不同处理的稀释液存放不同时间对精液品质的影响稀释液经过高温灭菌和加双抗两种处理之后,分别存放了3天和6天,检测这两个时间点的精液品质。结果表明,这两种处理在不同存放时间点的精液品质之间无显着差异,但进行高温灭菌处理的稀释液效果较优于加双抗处理的稀释液效果。
张凤艳[6]（2019）在《驴精液稀释中水的选择》文中研究指明驴精液稀释过程中器具的清洗和消毒、水的选择、剂量的控制、稀释剂的制备、稀释精液的包装和保存以及质量指标测定都需要严格控制。但基层精液供应站,由于制水设备不完善、水质得不到保障、稀释环境以及养殖户采精时间不确定,诸多因素很难保证每次都能使用无菌双蒸水稀释精液,本文采用两种市面上常见的瓶装饮用水配制精液稀释液,探讨了随着保存时间的延长其对精液质量的影响,结果表明采用哇哈哈纯净水和怡宝纯净水配制的精液稀释液保存精液72 h后精子活力仍大于47%,显着优于无菌双蒸水配制的稀释液,可作为基层驴精液稀释液用水。
李玉巧[7]（2018）在《高效公猪精液稀释剂配方设计与效果研究》文中研究说明随着人工授精技术在养猪行业的普及推广,精液保存技术也备受关注,精液的保存质量直接影响着人工授精的成功率与母畜受胎率和产仔率。精液稀释剂起到了保护精子的作用,稀释剂的成分可以保持精子活力,保证精子顶体和质膜的完整性。但目前市场上的精液稀释剂的成分比较复杂,而且保存时间不长,效果不稳定。为了研发出高效且保存效果稳定的稀释剂配方,本研究设计了六种新的猪精液稀释剂酉配方,分别是以Modena稀释液为基础的改版Modena稀释液—A配方,以抗氧化作用为特点的B配方,以添加高分子添加剂为特点的C配方,以采用非厌氧酵解底物的糖源为特点的D配方,以提高运动性为主的E配方,以及以减缓精子沉降速度为特点的F配方。以经典的猪精液稀释剂配方（Modena稀释液）和市场同类产品Cont为对照,通过比较测定精子活力、质膜完整率、精子畸形率及体外受精卵裂率和囊胚率等指标,验证了各配方在常温及低温状态下的精子保存效果,并对筛选出的最优稀释液配方进行了进一步优化,初步研发成功了一种效果优良的猪精液保存剂配方,为研发高效的公猪精液稀释剂产品打下了基础。以下为本研究的主要结果:1.精液常温保存条件下稀释液配方的筛选:对利用各配方常温条件下保存的精子活力、质膜完整率和精子畸形率等进行测定,结果显示:D配方的保存效果最佳,C配方的保存效果次之,在保存到第7d后两者的保存效果才存在显着差异（P<0.05）。D配方保存到第9d精子活力仍可达0.5以上,质膜完整率和精子畸形率分别为41%和74.4%。C配方保存到第8d精子活力在0.5以上,质膜完整率和精子畸形率分别为33.6%和69%。A配方的保存效果虽然低于C配方和D配方,但在保存到第7d活力仍然在0.5以上,质膜完整率和精子畸形率分别为25.3%和54.5%。E配方的保存效果低于A配方,在保存第7d时精子活力为0.52,B配方和F配方的保存效果显着低于其他配方（P<0.05）,再保存第4d时精子活力为0.49和 0.52。2.精液低温保存条件下稀释液配方的筛选:D配方的保存效果最佳,C配方的保存效果次之,且在保存的1～6d,两组配方的保存效果不存在显着差异（P>0.05）。D配方保存到第7d精子活力仍可达0.5以上,质膜完整率和精子畸形率分别为46.4%和78.2%。C配方保存到第6d精子活力在0.6以上,质膜完整率和精子畸形率分别为41.6%和76.4%。A配方的保存效果虽然低于C配方和D配方,但在保存到第6d活力仍然在0.5以上,质膜完整率和精子畸形率分别为34.4%和69.6%。E配方在保存第4d时精子活力为0.52,B配方和F配方的保存效果显着低于其他配方（P<0.05）,保存第4d时精子活力分别为0.43和0.53。3.配方优化试验:在通过六种配方比较筛选出其中最佳的C配方和D配方的基础上,进一步调整优化了两种配方的成分配比,设计出两种新配方T1、T2,并与D配方和市场在售的Cont配方进行了对比,结果显示:T1配方和T2配方的保存效果比D配方和Cont配方的保存效果好,T2配方的效果好于T1配方,D配方的保存效果高于Cont配方。在保存的1～3d,T1配方和T2配方的精子活力、质膜完整率和精子畸形率都不存在显着差异（P>0.05）,仅在第4d和第5d时T2配方的精子活力显着高于T1配方（P<0.05）,T2组的精子活力、质膜完整率和精子畸形率与Cont配方间差异显着（P<0.05）。4.优化配方保存精液的体外受精效果验证:通过对比T2配方与Cont配方、Modena保存到第5d的精液进行体外受精后受精卵的分裂率可以看出,T2配方保存的精液质量优于其他两个配方。5.摇匀频率对精液常温保存效果的影响:稀释精液保存期间实施不同时间间隔的摇匀操作,比较测定不同摇匀次数的精子活力、质膜完整率、精子畸形率等指标,结果显示,利用C配方保存的精液每隔12h、1d、2d摇匀一次的实验组之间,精子活力、质膜完整率和精子畸形率均不存在显着差异（P<0.05）,而Modena基础液和Cont配方的每隔12h、1d、2d、3d摇匀一次的实验组的精子活力、质膜完整率和精子畸形率等均依次显着降低（P<0.05）。表明添加了高分子X的C配方可以减少摇匀频率,使稀释保存精液的管理省时省力。
吐来力江·哈木太,吐尔逊江·吾木尔艾力,柯丽白,艾比拜木,刘宜勇,杨光维,乃比江·加纳比力[8]（2017）在《不同稀释液对种公羊精液保存效果的分析》文中研究表明为探讨不同稀释液和不同稀释倍数对精液保存的效果,采用不同稀释液及不同稀释倍数精液保存时间的比较分析方法,分析不同稀释液及不同稀释倍数对精液保存效率。结果表明:稀释液Ⅳ、Ⅴ稀释精液的精子有效存活时间最长,达到48h;其次是稀释液Ⅱ、Ⅲ有效保存时间分别达到12h、36h;稀释液Ⅰ的保存时间最短,到12h时所有精子均死亡。5、10、15比例稀释的精液保存效率最佳。稀释液中用双蒸水和去离子水效果一样。
曹建国,许栋,沈晓林,涂尾龙,张和军,吴华莉,谈永松[9]（2016）在《公猪精液在物流配送过程中的防震抗震、增温控温调控技术的研究》文中研究说明试验旨在研究防震水袋、暖宝宝、降温冰袋在种公猪精液配送过程中的应用效果,以期找到精液配送过程中防震抗震、高温季节降温、寒冷季节增温的最佳方法。结果表明,在外界温度5℃以下时的低温寒冷季节,利用泡沫箱内置上下二层500 m L自制水袋+中层气泡膜包裹稀释精液+下层暖宝宝1个的处理组合,平均提升箱内温度1.5℃,使箱内温度控制在相对稳定、适合的范围内,有效地保护精子质量,经检测连续保存96 h平均提高精子活力7.26%、降低精子畸形率5.58%,与常规组相比延长保存时间24 h以上。在外界温度30℃以上的高温炎热季节,利用泡沫箱内置上下二层500 m L自制水袋+中层气泡膜包裹稀释精液+下层300 m L冰袋1个的处理组合,平均降低箱内温度8.0℃,使箱内温度均衡有效地控制在适合的范围内,有效地保护精子质量,经检测连续保存96 h平均提高精子活力6.94%、降低精子畸形率7.54%,与常规组相比延长保存时间48 h。试验所得方法经验证,经济实惠,效果显着。
黄琳[10]（2016）在《黑凤鸡精液DMA颗粒冷冻保存技术研究》文中研究表明精液冷冻保存是当前长久保留禽类物种遗传资源最适用的方式,可大幅度降低保种成本。目前,鸡冻精受精率平均为60%,但变化极大（0%-90%）,还无法广泛应用。本研究以DMA为冷冻保护剂对黑凤鸡精液进行颗粒冷冻保存,通过检测解冻精子的活力、受精率及孵化率,从不同精液稀释液、平衡时间、DMA浓度、解冻设备、鸡的品种等5个方面,对鸡精液冷冻进行较为系统的研究,为建立高效规范的鸡精液冷冻技术,利用冷冻精液保存我国珍稀的地方鸡种资源提供技术支撑。实验结果表明：①精液稀释液筛选：4种不同稀释液中,LR稀释液对冷冻精子活力、受精率与孵化率的结果都是最佳,解冻精子活力为0.64,受精率为49.49%,孵化率为40.11%,与F液、B液、L液的差异显着（p<0.05）。②两次平衡时间的筛选：第一次平衡时间,30 min时冷冻结果最佳,解冻精液活力为0.64,受精率为50.73%,孵化率为48.59%,均显着地优于其他平衡的时间（p<0.05）；而第二次平衡时间,10 min时冷冻结果最佳,解冻精液活力为0.63,受精率与孵化率分别为52.14%、51.22%。③冷冻保护剂DMA浓度的筛选：黑凤鸡最合适的DMA浓度为6%,均显着优于他浓度组（p<0.05）,解冻精子活力为0.64,受精率为46.67%,孵化率为40.68%。④解冻方法筛选：在恒温水浴、恒温漏斗、恒温板3种解冻方法中,用薄壁大玻璃试管装多颗冻精在60℃恒温水浴中,解冻到颗粒冻精融解到1/3后的效果较好,解冻精子活力为0.59,受精率为23.08%。50℃恒温板、60℃恒温水浴与40℃恒温漏斗,解冻精子活力之间差异显着（p<0.05）,但他们之间的受精率差异均不显着（p>0.05）。⑤不同的鸡品种对冻精效果的影响：公鸡方面,黑凤鸡精液在冷冻前后活力均比白莱航鸡的要好,且差异显着（p<0.05）；母鸡方面,用黑凤鸡DMA颗粒冻精对黑凤鸡母鸡进行输精,获得的受精率高达74.19%,孵化率为67.74%,均显着高于白莱航母鸡、伊莎母鸡（p<0.05）,也高于文献报道的受精率平均数（60%）。因此,采用添加了LR稀释液的黑凤鸡稀释精液,平衡30 mmin后再添加6%DMA冷冻保护剂,继续进行平衡10 mmin,以50 uL体积直接滴入液氮,制成颗粒冻精,用60℃恒温水浴解冻,以0.2 mL间隔2天输一次精,能获得达到国际先进水平的受精率。此外,解冻后精子活力与受精率检测的相对趋势一致,为同类研究检测方法的简化提供了依据。
二、浅析猪的稀释精液配制技术（论文开题报告）
（1）论文研究背景及目的
此处内容要求：
首先简单简介论文所研究问题的基本概念和背景，再而简单明了地指出论文所要研究解决的具体问题，并提出你的论文准备的观点或解决方法。
写法范例：
本文主要提出一款精简64位RISC处理器存储管理单元结构并详细分析其设计过程。在该MMU结构中,TLB采用叁个分离的TLB,TLB采用基于内容查找的相联存储器并行查找,支持粗粒度为64KB和细粒度为4KB两种页面大小,采用多级分层页表结构映射地址空间,并详细论述了四级页表转换过程,TLB结构组织等。该MMU结构将作为该处理器存储系统实现的一个重要组成部分。
（2）本文研究方法
调查法：该方法是有目的、有系统的搜集有关研究对象的具体信息。
观察法：用自己的感官和辅助工具直接观察研究对象从而得到有关信息。
实验法：通过主支变革、控制研究对象来发现与确认事物间的因果关系。
文献研究法：通过调查文献来获得资料，从而全面的、正确的了解掌握研究方法。
实证研究法：依据现有的科学理论和实践的需要提出设计。
定性分析法：对研究对象进行“质”的方面的研究，这个方法需要计算的数据较少。
定量分析法：通过具体的数字，使人们对研究对象的认识进一步精确化。
跨学科研究法：运用多学科的理论、方法和成果从整体上对某一课题进行研究。
功能分析法：这是社会科学用来分析社会现象的一种方法，从某一功能出发研究多个方面的影响。
模拟法：通过创设一个与原型相似的模型来间接研究原型某种特性的一种形容方法。
三、浅析猪的稀释精液配制技术（论文提纲范文）
（1）抗冻剂组合和平衡时间与鸡精液冻后活力关系的研究（论文提纲范文）
| 1 材料 |
| 1.1 试验动物 |
| 1.2 主要试剂 |
| 1.3 主要仪器 |
| 2 方法 |
| 2.1 精液采集 |
| 2.2 稀释液配制 |
| 2.3 稀释与平衡 |
| 2.4 冷冻 |
| 2.5 解冻 |
| 2.6 数据的统计分析 |
| 3 结果与分析 |
| 3.1 抗冻剂8%甘油和不同平衡时间对鸡精液冻后效果的影响 |
| 3.2 抗冻剂组合8%甘油+6%DMSO和不同平衡时间对鸡精液冻后效果的影响 |
| 3.3 抗冻剂组合8%甘油+6%DMSO+4%EG和不同平衡时间对鸡精液冻后效果的影响 |
| 4 讨论 |
| 5 小结 |
（2）在稀释液中添加虾青素对鸡精液保存效果影响的研究（论文提纲范文）
| 摘要 |
| ABSTRACT |
| 第一章 综述 |
| 前言 |
| 1.1 鸡人工授精的发展现状 |
| 1.2 公鸡精液保存技术现状 |
| 1.2.1 公鸡精液低温保存技术现状 |
| 1.2.2 公鸡精液常温保存技术现状 |
| 1.2.3 影响公鸡精液保存的条件 |
| 1.3 公鸡精液保存稀释液成分 |
| 1.3.1 能量物质 |
| 1.3.2 缓冲物质 |
| 1.3.3 抗生素 |
| 1.4 抗氧化剂 |
| 1.4.1 抗氧化剂在精液稀释液中的应用 |
| 1.4.2 虾青素 |
| 1.5 鸡精子质量检测 |
| 1.5.1 鸡精子活力 |
| 1.5.2 鸡精液抗氧化性 |
| 1.5.3 鸡精子质膜完整性 |
| 1.5.4 鸡精子顶体完整性 |
| 1.5.5 鸡精子畸形率 |
| 1.5.6 鸡精子能量代谢 |
| 1.6 精子受精能力 |
| 1.7 研究目的及意义 |
| 第二章 在稀释液中添加虾青素对鸡精液低温保存效果的影响 |
| 前言 |
| 2.1 试验材料 |
| 2.1.1 试验材料 |
| 2.1.2 主要仪器及耗材 |
| 2.1.3 主要试剂的配制 |
| 2.2 试验方法 |
| 2.2.1 试验设计 |
| 2.2.2 试验精液保存 |
| 2.2.3 精液测定指标 |
| 2.3 试验结果与分析 |
| 2.3.1 低温保存条件下稀释精液中精子活力分析 |
| 2.3.2 低温保存条件下稀释精液中精子顶体完整率分析 |
| 2.3.3 低温保存条件下稀释精液中精子质膜完整率分析 |
| 2.3.4 低温保存条件下稀释精液精子畸形率分析 |
| 2.3.5 低温保存条件下稀释精液能量代谢分析 |
| 2.3.6 低温保存条件下稀释精液抗氧化能力分析 |
| 2.3.7 低温保存条件下稀释精液受精率结果分析 |
| 2.4 讨论 |
| 2.5 小结 |
| 第三章 虾青素对鸡精液常温保存效果的影响 |
| 前言 |
| 3.1 试验材料 |
| 3.1.1 实验材料 |
| 3.1.2 主要仪器及耗材 |
| 3.1.3 主要试剂的配制 |
| 3.2 试验方法 |
| 3.2.1 试验设计 |
| 3.2.2 精液保存 |
| 3.2.3 精液测量指标 |
| 3.3 试验结果与分析 |
| 3.3.1 常温保存条件下稀释精液中精子活力分析 |
| 3.3.2 常温保存条件下稀释精液中精子顶体完整率分析 |
| 3.3.3 常温保存条件下稀释精液中精子质膜完整率分析 |
| 3.3.4 常温保存条件下稀释精液精子畸形率分析 |
| 3.3.5 常温保存条件下稀释精液能量代谢分析 |
| 3.3.6 常温保存条件下稀释精液抗氧化能力分析 |
| 3.3.7 常温保存条件下稀释精液受精成功率检测 |
| 3.4 讨论 |
| 3.5 小结 |
| 第四章 稀释液中添加虾青素与番茄红素对鸡精液保存效果的比较 |
| 前言 |
| 4.1 试验材料 |
| 4.1.1 实验材料 |
| 4.1.2 主要仪器及耗材 |
| 4.1.3 主要试剂的配制 |
| 4.2 试验方法 |
| 4.2.1 试验设计 |
| 4.2.2 精液测量指标 |
| 4.3 试验结果与分析 |
| 4.3.1 低温(4℃)保存条件下试验结果与分析 |
| 4.3.2 常温(25~30℃)保存条件下试验结果与分析 |
| 4.4 讨论 |
| 4.5 小结 |
| 结论与创新点 |
| 结论 |
| 创新点 |
| 参考文献 |
| 致谢 |
| 攻读学位期间发表论文情况 |
（3）蒙古马精液冷冻保存的研究（论文提纲范文）
| 摘要 |
| Abstract |
| 缩略语表 |
| 引言 |
| 1 文献综述 |
| 1.1 马精液冷冻保存的研究进展 |
| 1.2 马精液冷冻保存中存在的问题 |
| 1.3 AI在国内外的使用状况 |
| 1.4 AI使用效率低下的原因 |
| 1.5 马精液冷冻保存损伤机制 |
| 1.5.1 机械损伤 |
| 1.5.2 氧化损伤 |
| 1.6 影响马精液冷冻保存质量的因素 |
| 1.6.1 外观 |
| 1.6.2 精液量 |
| 1.6.3 精液密度 |
| 1.6.4 精清 |
| 1.6.5 离心 |
| 1.6.6 渗透压 |
| 1.6.7 降温速率 |
| 1.6.8 平衡时间 |
| 1.6.9 解冻程序 |
| 1.7 马精液冷冻保存液的主要成分 |
| 1.7.1 冷冻保护剂 |
| 1.7.2 卵黄 |
| 1.7.3 糖类 |
| 1.7.4 抗氧化剂 |
| 1.8 马精液品质常用测定指标 |
| 1.8.1 精子活率 |
| 1.8.2 精子形态 |
| 1.8.3 顶体完整率 |
| 1.8.4 质膜完整率 |
| 1.8.5 线粒体膜电位 |
| 1.8.6 抗氧化能力 |
| 2 蒙古马细管精液冷冻程序的优化研究 |
| 2.1 材料与方法 |
| 2.1.1 试验动物 |
| 2.1.2 主要试剂 |
| 2.1.3 马冷冻精液的制作 |
| 2.1.4 试验设计 |
| 2.1.5 精子质量评价 |
| 2.1.6 数据统计与分析 |
| 2.2 结果 |
| 2.2.1 渗透压对蒙古马精液冷冻保存效果的影响 |
| 2.2.2 不同离心方法去除精清对蒙古马精液冷冻质量及精子损失率的影响 |
| 2.2.3 不同平衡时间对蒙古马精液冷冻保存效果的影响 |
| 2.2.4 不同降温速率对蒙古马精液冷冻保存效果的影响 |
| 2.3 讨论 |
| 2.3.1 渗透压对蒙古马精液冷冻保存效果的影响 |
| 2.3.2 不同离心方法去除精清对蒙古马精液冷冻质量及精子损失率的影响 |
| 2.3.3 不同平衡时间对蒙古马精液冷冻保存效果的影响 |
| 2.3.4 不同降温速率对蒙古马精液冷冻保存效果的影响 |
| 2.4 结论 |
| 3 冷冻保护液不同成分对蒙古马细管精液冷冻效果的研究 |
| 3.1 材料与方法 |
| 3.1.1 试验动物的选择 |
| 3.1.2 主要试剂 |
| 3.1.3 马冷冻精液的制作 |
| 3.1.4 试验设计 |
| 3.1.5 精子质量评价 |
| 3.1.6 数据统计分析 |
| 3.2 结果 |
| 3.2.1 不同浓度gly和DMF对马精子冷冻效果的影响 |
| 3.2.2 不同浓度卵黄、LDL对蒙古马精子低温保存及冷冻效果的影响 |
| 3.2.3 不同糖类组合对马精子低温保存效果的影响 |
| 3.3 讨论 |
| 3.3.1 不同浓度gly和DMF对马精子冷冻效果的影响 |
| 3.3.2 不同浓度卵黄、LDL对蒙古马精子低温保存及冷冻效果的影响 |
| 3.3.3 不同糖类组合对马精子低温保存效果的影响 |
| 3.4 结论 |
| 4 不同抗氧化剂对蒙古马精液品质的影响 |
| 4.1 材料与方法 |
| 4.1.1 试验动物的选择 |
| 4.1.2 主要试剂 |
| 4.1.3 马冷冻精液的制作 |
| 4.1.4 试验设计 |
| 4.1.5 精子质量评价 |
| 4.1.6 统计分析 |
| 4.2 结果与分析 |
| 4.2.1 不同抗氧化剂对冷冻-解冻后马精子质量的影响 |
| 4.2.2 不同抗氧化剂对蒙古马精液中抗氧化相关指标的影响 |
| 4.3 讨论 |
| 4.4 结论 |
| 5 蒙古马细管精液冷冻保护液的验证 |
| 5.1 材料与方法 |
| 5.1.1 试验动物的选择 |
| 5.1.2 稀释液的制备 |
| 5.1.3 精液的采集 |
| 5.1.4 精液的处理 |
| 5.1.5 精液的冷冻及解冻 |
| 5.1.6 试验设计 |
| 5.1.7 母马的管理和人工授精 |
| 5.1.8 数据统计分析 |
| 5.2 结果 |
| 5.2.1 冻后活力均值 |
| 5.2.2 受胎率验证 |
| 5.3 讨论 |
| 5.3.1 输精方法对受胎率的影响 |
| 5.3.2 不同种公马精液对受胎率的影响 |
| 5.3.3 不同精子活力对受胎率的影响 |
| 5.4 小结 |
| 6 结论 |
| 7 研究创新点 |
| 致谢 |
| 附录 |
| 作者简介 |
| 参考文献 |
（4）猪精子能量代谢的调控机理研究（论文提纲范文）
| 摘要 |
| ABSTRACT |
| 主要符号对照表 |
| 文献综述 |
| 第一章 猪精子保存研究进展 |
| 1.1 猪人工授精技术的研究进展 |
| 1.2 猪精液和精子 |
| 1.2.1 猪精囊腺、前列腺及尿道球腺的生理特点 |
| 1.2.2 精子发生 |
| 1.2.3 公猪精液的特点 |
| 1.2.4 猪精子的生理结构特点 |
| 1.2.5 猪精浆成份特点 |
| 1.3 精子在雌性生殖道内的迁移 |
| 1.3.1 子宫颈、子宫与精子的互作 |
| 1.3.2 输卵管与精子的互作 |
| 1.4 猪精液保存的主要方式 |
| 1.4.1 常温保存 |
| 1.4.2 冷冻保存 |
| 1.5 常温保存稀释液 |
| 1.5.1 猪精液常温稀释液种类介绍 |
| 1.5.2 稀释液的营养成份 |
| 1.5.3 稀释液的pH |
| 1.5.4 稀释液的渗透压 |
| 1.5.5 稀释液抗生素的使用 |
| 1.6 精子质量检测方法 |
| 1.6.1 精子运动指标分析 |
| 1.6.2 质膜完整 |
| 1.6.3 顶体完整 |
| 1.6.4 线粒体活性 |
| 1.6.5 精子的脂质过氧化检测 |
| 第二章 精子能量代谢研究进展 |
| 2.1 精子糖酵解途径研究 |
| 2.1.1 糖酵解供能 |
| 2.1.2 糖酵解与精子功能的关系 |
| 2.2 精子线粒体氧化磷酸化 |
| 2.2.1 精子线粒体的特征及功能 |
| 2.2.2 精子线粒体氧化磷酸化供能途径 |
| 2.2.3 精子线粒体呼吸链复合物 |
| 2.3 精子糖酵解与氧化磷酸化代谢途径的关系 |
| 第三章 精子ROS氧化损伤研究进展 |
| 3.1 ROS的种类 |
| 3.2 ROS的来源 |
| 3.2.1 精液ROS的内源来源 |
| 3.2.2 精液ROS的外源来源 |
| 3.3 精子ROS的产生 |
| 3.4 ROS对精子的影响 |
| 3.4.1 ROS有利于促进精子功能 |
| 3.4.2 ROS对精子的不利影响 |
| 3.5 抗氧化剂的应用 |
| 3.5.1 酶类抗氧化剂 |
| 3.5.2 非酶类抗氧化剂 |
| 3.5.3 胺类激素物质 |
| 3.6 研究目的与意义 |
| 试验部分 |
| 第四章 线粒体氧化磷酸化对猪精子运动方式的调节 |
| 4.1 材料和方法 |
| 4.1.1 主要仪器设备 |
| 4.1.2 主要材料和试剂 |
| 4.2 试验步骤 |
| 4.2.1 试验动物及其饲养 |
| 4.2.2 猪精液采集 |
| 4.2.3 猪精液稀释处理 |
| 4.2.4 猪精液孵育处理 |
| 4.2.5 猪精子运动分析 |
| 4.2.6 猪精子质膜完整指标检测 |
| 4.2.7 流式细胞分析猪精子线粒体活性 |
| 4.2.8 线粒体基因在猪精子上的表达分析 |
| 4.2.9 猪精子ATP含量分析 |
| 4.2.10 猪精子线粒体蛋白的免疫荧光分析 |
| 4.2.11 Western Blotting检测猪精子线粒体蛋白在孵育过程的表达变化 |
| 4.3 结果与分析 |
| 4.3.1 利用不同梯度浓度葡萄糖的Modena液孵育精子而探究精子直线运动与葡萄糖含量的关系 |
| 4.3.2 线粒体呼吸链复合物I抑制剂鱼藤酮降低精子的直线运动、线粒体活性及ATP含量 |
| 4.3.3 猪精子线粒体基因转录与翻译 |
| 4.3.4 线粒体翻译抑制剂CRP呈浓度依赖性抑制线粒体翻译而降低精子的直线运动 |
| 4.3.5 线粒体翻译抑制剂CRP呈时间依赖性抑制线粒体翻译而降低精子的直线运动 |
| 4.3.6 细胞质翻译抑制剂(CHX)和核转录抑制剂(AMNT)不影响猪精子的直线运动方式 |
| 4.4 讨论 |
| 4.5 小结 |
| 第五章 低糖稀释产生的ROS对猪精子的损伤机理研究 |
| 5.1 材料和方法 |
| 5.1.1 仪器 |
| 5.1.2 主要试剂 |
| 5.1.3 相关抗体 |
| 5.1.4 相关试剂配制 |
| 5.2 试验步骤 |
| 5.2.1 试验动物及其饲养 |
| 5.2.2 猪精液采集 |
| 5.2.3 猪精液稀释处理 |
| 5.2.4 猪精液孵育处理 |
| 5.2.5 猪精子运动指标检测 |
| 5.2.6 流式细胞术分析猪精子线粒体活性 |
| 5.2.7 DNA分离和长链PCR扩增 |
| 5.2.9 猪精子ATP含量分析 |
| 5.2.10 猪精子线粒体ROS含量分析 |
| 5.2.11 猪精子线粒体蛋白的免疫荧光分析 |
| 5.2.12 Western Blotting检测猪精子蛋白在孵育过程的表达变化 |
| 5.3 结果与分析 |
| 5.3.1 低糖稀释液稀释后在孵育过程中精子的运动形式 |
| 5.3.2 低糖应激对精子损伤的机理 |
| 5.3.3 PQQ和 Co Q10 处理降低精子ROS含量,减少线粒体蛋白损伤,并增加线粒体膜电位、ATP含量和精子直线运动 |
| 5.3.4 在线粒体翻译抑制剂D-氯霉素(CRP)处理下,PQQ和 Co Q10 不能增加线粒体蛋白含量及精子直线运动 |
| 5.3.5 在低糖稀释液中添加PQQ或 Co Q10 会增强精子的线粒体基因转录与翻译 |
| 5.3.6 细胞质翻译抑制剂(CHX)和核转录抑制剂(AMNT)不影响精子的TFAM和POLRMT水平 |
| 5.4 .讨论 |
| 5.5 小结 |
| 第六章 精子谷胱甘肽合成系统调控精子运动 |
| 6.1 材料和方法 |
| 6.1.1 主要仪器设备 |
| 6.1.2 主要材料和试剂 |
| 6.2 试验步骤 |
| 6.2.1 试验动物及其饲养 |
| 6.2.2 猪精液采集 |
| 6.2.3 猪精液稀释处理 |
| 6.2.4 猪精液孵育处理 |
| 6.2.5 精浆氨基酸的分析 |
| 6.2.6 猪精子运动指标检测 |
| 6.2.7 流式细胞分析猪精子线粒体活性 |
| 6.2.8 精子总谷胱甘肽含量 |
| 6.2.9 精子ROS检测 |
| 6.2.10 猪精子CBS、CTH、GCLC、GSS基因的表达分析 |
| 6.2.11 猪精子ATP含量分析 |
| 6.2.12 Western Blotting检测 |
| 6.3 结果与分析 |
| 6.3.1 猪精浆中的GSH合成底物(氨基酸)与精液品质关系 |
| 6.3.2 在低糖稀释液中添加蛋氨酸会促进猪精子的直线运动 |
| 6.3.3 抑制谷胱甘肽的合成会降低精子的直线运动 |
| 6.3.4 低糖稀释液激活精子翻译合成CBS和 CTH限制酶而利用Met合成GSH |
| 6.3.5 氧化应激诱导精子利用蛋氨酸合成GSH相关蛋白酶的合成 |
| 6.3.6 氧化应激激活精子的ERK1/2/ e IF4E/RSK信号通路,合成相关蛋白酶,从而利用蛋氨酸合成GSH而缓解ROS对精子氧化损伤 |
| 6.4 讨论 |
| 6.5 小结 |
| 第七章 磷酸戊糖途径参与猪精子运动的调控 |
| 7.1 材料和方法 |
| 7.1.1 主要仪器设备 |
| 7.1.2 主要材料和试剂 |
| 7.2 试验步骤 |
| 7.2.1 试验动物及其饲养 |
| 7.2.2 猪精液采集 |
| 7.2.3 猪精液稀释处理 |
| 7.2.4 猪精液孵育处理 |
| 7.2.5 猪精子运动指标检测 |
| 7.2.6 流式细胞分析猪精子线粒体活性 |
| 7.2.7 精子还原型总谷胱甘肽与氧化谷胱甘肽的比值检测 |
| 7.2.8 精子总NADPH含量及NADPH/NADP+的比值检测 |
| 7.2.9 精子ALDOA活性检测 |
| 7.2.10 精子G6PD活性检测 |
| 7.2.11 精子总衣康酸修饰检测 |
| 7.2.12 GS/MS检测精子和精液中的衣康酸 |
| 7.2.13 精子ROS检测 |
| 7.2.14 猪精子质膜完整指标检测 |
| 7.2.15 猪精子ATP含量分析 |
| 7.2.16 Western Blotting |
| 7.3 结果与分析 |
| 7.3.1 葡萄糖对精子运动的影响 |
| 7.3.2 猪精子存在NADPH的磷酸戊糖途径合成系统 |
| 7.3.3 G6PD活性抑制剂(6-AN)抑制精子磷酸戊糖途径,调节精子直线运动 |
| 7.3.4 精子衣康酸修饰抑制糖酵解途径,促进磷酸戊糖途径 |
| 7.4 讨论 |
| 7.5 小结 |
| 结论 |
| 本研究创新点 |
| 后续研究工作 |
| 参考文献 |
| 致谢 |
| 个人简历 |
（5）海扬黄鸡配套亲本精液品质比较及特定稀释液稀释效果的分析（论文提纲范文）
| 中文摘要 |
| Abstract |
| 第一章 文献综述 |
| 1 中国地方鸡选育现状 |
| 2 精液品质 |
| 2.1 精液品质的评价指标 |
| 2.2 精液品质的检测方法 |
| 2.3 精液品质的研究进展 |
| 3 种公鸡精液品质的影响因素 |
| 3.1 种公鸡的选留和训练 |
| 3.2 营养因素 |
| 3.3 采精时间和次数 |
| 4 公鸡精液稀释液的研究进展 |
| 4.1 鸡精液稀释液的分类 |
| 4.2 鸡精液稀释液的pH |
| 4.3 鸡精液稀释液的渗透压 |
| 4.4 鸡精子稀释液的物质 |
| 4.5 影响公鸡精液稀释液的其他因素 |
| 5 海扬黄鸡配套系简介 |
| 6 研究的目的和意义 |
| 第二章 海扬黄鸡配套系亲本精液品质的比较 |
| 1 材料与方法 |
| 1.1 试验动物及试验设计方法 |
| 1.2 饲养管理 |
| 1.3 试验仪器设备及试剂 |
| 1.4 测定指标及方法 |
| 1.4.1 精液量 |
| 1.4.2 精液pH值 |
| 1.4.3 精子密度 |
| 1.4.4 精子活率 |
| 1.4.5 精子畸形率 |
| 1.4.6 质膜完整性 |
| 1.4.7 有效精子数 |
| 1.5 数据统计分析 |
| 2 结果与分析 |
| 2.1 海扬黄鸡配套系亲本公鸡精液品质特征 |
| 2.2 海扬黄鸡配套系亲本精液品质比较结果 |
| 2.3 精液品质各指标之间的相关分析结果 |
| 3 讨论 |
| 第三章 特定稀释液不同稀释倍数和体外存放时间对精液品质的影响 |
| 1 材料方法 |
| 1.1 试验材料 |
| 1.2 稀释液配方 |
| 1.3 研究方案 |
| 1.4 试验仪器设备与试剂 |
| 1.5 数据统计分析方法 |
| 2 结果与分析 |
| 2.1 不同稀释倍数对FF系公鸡精液品质的影响结果 |
| 2.2 不同体外存放时间对FF系公鸡精液品质的比较结果 |
| 3 讨论 |
| 第四章 不同稀释液以及体外存放时间对精液品质的影响 |
| 1 材料与方法 |
| 1.1 试验材料和试验设计 |
| 1.2 稀释液的制备 |
| 1.3 仪器设备及试剂 |
| 1.4 测定指标 |
| 1.5 数据分析 |
| 2 结果与分析 |
| 2.1 不同稀释液在体外存放不同时间的精液品质比较结果 |
| 2.2 不同稀释液存放不同天数对精液稀释效果的比较结果 |
| 3 讨论 |
| 全文结论 |
| 参考文献 |
| 致谢 |
（6）驴精液稀释中水的选择（论文提纲范文）
| 1材料和方法 |
| 1.1时间和地点 |
| 1.2试验动物 |
| 1.3仪器和设备 |
| 1.4采集精液 |
| 1.5测试方法 |
| 1.5.1稀释剂的制备 |
| 1.5.2稀释精液pH值与活力的检测 |
| 2结果与分析 |
| 2.1稀释前的精子活力变化 |
| 2.2稀释后的精子活力变化 |
| 3讨论 |
（7）高效公猪精液稀释剂配方设计与效果研究（论文提纲范文）
| 中文摘要 |
| ABSTRACT |
| 文献综述 |
| 第一章 公猪精液稀释剂配方的研究进展 |
| 前言 |
| 1.1 猪人工授精技术应用概况 |
| 1.1.1 国外猪人工授精技术的研究进展与应用现状 |
| 1.1.2 国内猪人工授精技术的研究进展与应用现状 |
| 1.2 猪精液稀释保存的研究进展 |
| 1.2.1 常温保存 |
| 1.2.2 低温保存 |
| 1.2.3 影响精液保存的主要因素 |
| 1.3 精子质量的检测指标 |
| 1.3.1 精子活力 |
| 1.3.2 精子顶体完整率 |
| 1.3.3 精子质膜完整率 |
| 1.3.4 线粒体膜电位 |
| 1.3.5 总抗氧化能力(T-AOC) |
| 1.3.6 丙二醛(MDA)含量 |
| 1.3.7 精子细胞内活性氧水平 |
| 1.3.8 体外受精实验 |
| 1.3.9 母猪体内受精的田间试验 |
| 1.4 本研究的目的与意义 |
| 试验研究 |
| 第二章 猪精液常温保存稀释剂配方设计与筛选 |
| 前言 |
| 2.1 材料与方法 |
| 2.1.1 试验材料 |
| 2.1.2 试验方法 |
| 2.1.3 精子指标的检测方法 |
| 2.1.4 统计分析 |
| 2.2 结果与分析 |
| 2.2.1 不同精液稀释液在常温条件下对精子活力的影响 |
| 2.2.2 初筛配方在常温保存条件下对精子质膜完整率的影响 |
| 2.2.3 初筛配方在常温保存条件下对精子畸形率的影响 |
| 2.3 讨论 |
| 2.4 小结 |
| 第三章 猪精液低温保存稀释剂配方设计与筛选 |
| 前言 |
| 3.1 材料与方法 |
| 3.1.1 试验材料 |
| 3.1.2 试验方法 |
| 3.1.3 精子指标的检测方法 |
| 3.1.4 统计分析 |
| 3.2 结果与分析 |
| 3.2.1 不同精液稀释液在低温保存条件下对精子活力的影响 |
| 3.2.2 初筛配方在低温保存条件下对精子质膜完整率的影响 |
| 3.2.3 初筛配方在低温保存条件下对精子畸形率的影响 |
| 3.3 讨论 |
| 3.4 小结 |
| 第四章 优化配方对猪精液常温保存效果的影响 |
| 前言 |
| 4.1 材料与方法 |
| 4.1.1 试验材料 |
| 4.1.2 试验方法 |
| 4.1.3 精子指标的检测方法 |
| 4.1.4 统计分析 |
| 4.2 结果与分析 |
| 4.2.1 四种配方对精子活力的影响 |
| 4.2.2 四种配方对精子质膜完整率的影响 |
| 4.2.3 四种配方对精子畸形率的影响 |
| 4.3 讨论 |
| 4.4 小结 |
| 第五章 优化配方保存精液的体外授精效果验证 |
| 前言 |
| 5.1 材料与方法 |
| 5.1.1 试验材料 |
| 5.1.2 试验方法 |
| 5.1.3 指标的检测方法 |
| 5.1.4 统计分析 |
| 5.2 结果与分析 |
| 5.3 讨论 |
| 5.4 小结 |
| 第六章 摇匀频率对精液常温保存效果的影响 |
| 前言 |
| 6.1 材料与方法 |
| 6.1.1 试验材料 |
| 6.1.2 试验方法 |
| 6.1.3 指标测定方法 |
| 6.1.4 统计分析 |
| 6.2 结果与分析 |
| 6.2.1 摇匀频率对精子活力的影响 |
| 6.2.2 摇匀频率对精子质膜完整率的影响 |
| 6.2.3 摇匀频率对精子畸形率的影响 |
| 6.3 讨论 |
| 6.4 小结 |
| 全文结论 |
| 创新点 |
| 进一步研究内容 |
| 参考文献 |
| 附录 |
| 致谢 |
（8）不同稀释液对种公羊精液保存效果的分析（论文提纲范文）
| 1 材料 |
| 1.1 试验动物 |
| 1.2 试验器材及药物 |
| 2 方法 |
| 2.1 稀释液及成分 |
| 2.2 采集精液及品质检查 |
| 2.3 精液的稀释及保存 |
| 2.4 不同比例稀释 |
| 2.5 数据处理 |
| 3 结果与分析 |
| 3.1 不同稀释液低温保存精液效果 |
| 3.2 不同稀释比例下保存效率分析 |
| 4 讨论 |
| 5 结论 |
（9）公猪精液在物流配送过程中的防震抗震、增温控温调控技术的研究（论文提纲范文）
| 1 材料和方法 |
| 1.1 精液和试剂 |
| 1.1.1 精液采自上海祥欣畜禽有限公司种公猪站的杜洛克生产公猪。 |
| 1.1.2 精液稀释液全能健Z(商品名),猪精液稀释保存剂,生产批号14043515。 |
| 1.1.3 精子染色姬姆萨染料配制染色液,生产批号20140211。 |
| 1.2 主要仪器设备 |
| 1.2.1 精液预处理设备密度仪SDM1、双目显微镜SDE6500、电子天平、半自动包装机。 |
| 1.2.2 精液质量检测设备 |
| 1.2.3 温控防震耗材实时温度记录仪、暖宝宝、冰袋、气泡膜、水袋。 |
| 1.3 精液预处理 |
| 1.4 精液物流处理 |
| 1.4.1 防震抗震、增温保温处理 |
| 1.4.2 防震抗震、降温控温处理在外界温度30℃以上时的2014年7月和9月、2015年8月进行测试。同一公猪精液分为处理2组和常规2组,每组5份置于同一包装箱内,共运送8个批次。处理2组用气泡膜逐袋包裹稀释精液,置于泡沫保温箱中层,下层依次放置自制500 m L水袋1个、300 m L冰袋1个,上层放置自制500 m L水袋1个。常规2组仅用气泡膜逐袋包裹稀释精液并填充泡沫箱(表1)。 |
| 1.5 物流时间 |
| 1.6 测定项目和检测方法 |
| 1.6.1 精液质量检测方法根据GB 23238—2009《种猪常温精液》中的方法处理和判定[2]。 |
| 1.6.2 物流精液检测时间 |
| 2 测试结果 |
| 2.1 温度 |
| 2.1.1 增温保温 |
| 2.1.2 降温控温 |
| 2.2 精子活力 |
| 2.2.1 在外界温度5℃以下时的低温寒冷季节 |
| 2.2.2 在外界温度30℃以上时的高温炎热季节 |
| 2.3 精子畸形率 |
| 2.3.1 在外界温度5℃以下时的寒冷季节 |
| 2.3.2 在外界温度30℃以上时的高温炎热季节 |
| 3 讨论与小结 |
| 3.1 暖宝宝增温和保温效果 |
| 3.2 冰袋降温和控温的效果 |
| 3.3 提高保存精液的精子活力 |
| 3.4 降低保存精液的精子畸形率 |
| 4 结论 |
（10）黑凤鸡精液DMA颗粒冷冻保存技术研究（论文提纲范文）
| 摘要 |
| Abstract |
| 第一章 文献综述 |
| 前言 |
| 1 家禽精液的理化特点、化学构成和精子的形态特点 |
| 2 母禽繁殖生理特点 |
| 3 精液采集和稀释 |
| 4 冷冻保护剂 |
| 5 冷冻剂型 |
| 6 平衡时间、冷冻及解冻方式 |
| 6.1 平衡时间 |
| 6.2 冷冻程序 |
| 6.3 解冻程序 |
| 7 精液质量参数及检测方式 |
| 8 人工授精方案 |
| 9 展望 |
| 第二章 实验部分 |
| 实验一 稀释液对黑凤鸡DMA颗粒冻精的影响 |
| 1 实验材料与方法 |
| 1.1 实验材料 |
| 1.2 实验方法 |
| 2 结果与分析 |
| 3 讨论 |
| 4 小结 |
| 实验二 平衡时间对黑凤鸡DMA颗粒冻精的影响 |
| 1 实验材料与方法 |
| 1.1 实验材料 |
| 1.2 实验方法 |
| 2 结果与分析 |
| 3 讨论 |
| 4 小结 |
| 实验三 冷冻保护剂DMA浓度对黑凤鸡颗粒冻精的影响 |
| 1 实验材料与方法 |
| 1.1 实验材料 |
| 1.2 实验方法 |
| 2 结果与分析 |
| 3 讨论 |
| 4 小结 |
| 实验四 黑凤鸡DMA颗粒冻精解冻方法的研究 |
| 1 实验材料与方法 |
| 1.1 实验材料 |
| 1.2 实验方法 |
| 2 结果与分析 |
| 3 讨论 |
| 4 小结 |
| 实验五 品种对鸡DMA颗粒冻精的影响 |
| 1 实验材料与方法 |
| 1.1 实验材料 |
| 1.2 实验方法 |
| 2 结果与分析 |
| 3 讨论 |
| 4 小结 |
| 第三章 结论 |
| 参考文献 |
| 致谢 |
四、浅析猪的稀释精液配制技术（论文参考文献）
- [1]抗冻剂组合和平衡时间与鸡精液冻后活力关系的研究[J]. 陈世伟,张兆旺,孟锦涛. 黑龙江畜牧兽医, 2021(09)
- [2]在稀释液中添加虾青素对鸡精液保存效果影响的研究[D]. 施文. 广西大学, 2020(07)
- [3]蒙古马精液冷冻保存的研究[D]. 阿娜尔. 内蒙古农业大学, 2020(01)
- [4]猪精子能量代谢的调控机理研究[D]. 朱振东. 西北农林科技大学, 2020
- [5]海扬黄鸡配套亲本精液品质比较及特定稀释液稀释效果的分析[D]. 何晓燕. 扬州大学, 2019(06)
- [6]驴精液稀释中水的选择[J]. 张凤艳. 现代畜牧兽医, 2019(08)
- [7]高效公猪精液稀释剂配方设计与效果研究[D]. 李玉巧. 南京农业大学, 2018(08)
- [8]不同稀释液对种公羊精液保存效果的分析[J]. 吐来力江·哈木太,吐尔逊江·吾木尔艾力,柯丽白,艾比拜木,刘宜勇,杨光维,乃比江·加纳比力. 新疆畜牧业, 2017(05)
- [9]公猪精液在物流配送过程中的防震抗震、增温控温调控技术的研究[J]. 曹建国,许栋,沈晓林,涂尾龙,张和军,吴华莉,谈永松. 养猪, 2016(03)
- [10]黑凤鸡精液DMA颗粒冷冻保存技术研究[D]. 黄琳. 湖南农业大学, 2016(08)